Bufor cytrynianowy sodu jest stosowany do izolacji RNA, ponieważ minimalizuje hydrolizę zasadową nici RNA. To sprawia, że jest to ważny etap w oczyszczaniu mRNA podczas badań genomowych lub badania transkrypcji.
Bufory oparte na cytrynianach mogą również pomagać w wykrywaniu antygenów w utrwalonych preparatach tkankowych, ponieważ rozbijają wiązania poprzeczne utworzone pomiędzy antygenami i ośrodkiem utrwalającym.
W poniższym przewodniku sporządzić bufor cytrynianu sodu o pH 6. Instrukcje są nie tylko łatwe, ale i szybkie. Wykonanie tych czynności powinno zająć około 10 minut.
Dwie opcje utworzenia bufora
Istnieją dwa sposoby na zrobienie buforu cytrynianowego sodu. Najpierw sprawdź, czy masz do dyspozycji zarówno kwas cytrynowy, jak i koniugatową zasadę, cytrynian sodu. Jeśli masz tylko kwas cytrynowy, nie stanowi to problemu. Nadal możesz zrobić bufor.
Z drugiej strony, jeśli masz zarówno kwas, jak i bazę, utwórz roztwór podstawowy każdego z nich. Wymieszać 21 gramów kwasu cytrynowego w 1 litrze wody destylowanej i 29,4 gramów cytrynianu sodu w 1 litrze wody destylowanej.
Jeśli masz tylko kwas cytrynowy, wymieszaj 2,1 grama w zaledwie 1 litrze wody destylowanej i przejdź do następnego kroku.
Mieszanie kwasu cytrynowego i roztworów cytrynianu sodu
Teraz, gdy stworzyłeś swój roztwór podstawowy (jeśli miałeś kwas i zasadę) lub zmieszałeś kwas w wodzie destylowanej (jeśli nie), możesz skupić się na swoich rozwiązaniach.
Wymieszać 82 mililitry roztworu kwasu cytrynowego z 18 mililitrami roztworu cytrynianu sodu.
Następnie, całkowitą objętość mieszaniny do zaledwie 1 litra należy uzupełnić wodą destylowaną. Pozostaw wystarczającą objętość, aby umożliwić dodanie wodorotlenku sodu (NaOH) w następnym etapie.
Regulacja pH
Delikatnie mieszając roztwór za pomocą mieszadła magnetycznego, użyj 1 M wodorotlenku sodu, aby wyregulować pH mieszaniny do 6,0. Następnie ostateczną objętość roztworu należy zwiększyć do 1 litra za pomocą wody destylowanej za pomocą kolby pomiarowej.
Co trzeba zrobić, aby bufor
Nie tylko nie zajmie Ci bardzo dużo czasu, aby zrobić bufor cytrynianowy sodu, nie będziesz również potrzebował wielu materiałów. Z kwasem cytrynowym, 1M wodorotlenku sodu, wodą destylowaną i skalibrowaną sondą pH, będziesz w połowie drogi. Używanie cytrynianu sodu jest opcjonalne.
Wykonanie bufora będzie również wymagać 1-litrowego cylindra miarowego, 1-litrowej kolby pomiarowej i trzech 1-litrowych butelek z mediami. Na koniec potrzebna jest mieszadło magnetyczne i mieszadło magnetyczne.
Jeśli nie masz wszystkich tych materiałów, pomyśl o skorzystaniu z laboratorium w szkole lub miejscu pracy, więc nie musisz ich kupować samemu. Możesz również łatwo kupić te materiały przez Internet lub odwiedzić sklep ze specjalistycznymi towarami w Twojej okolicy.